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ELISA試劑盒進口大鼠假陽性和假陰性的結果
更新時間:2018-03-21   點擊次數(shù):1569次

如果ELISA試劑盒進口大鼠樣品稀釋液少加或血清多加,都會引起本底增高。對于間接法來說,受上述兩個因素影響更大。因為血清中受檢的特異性IgG只有IgG中的一小部分。IgG的吸附性很強,非特異性IgG可直接吸附到固相載體上,有時也可吸附到包被抗原的表面。這些非特異性的IgG均可以和酶標二抗發(fā)生反應而造成較高陰性本底或假陽性。如果加入的血清過多,高于規(guī)定的稀釋倍數(shù),極易造成高值陰性。反之,造成假陰性。
如果加入的酶結合物過多或加在較高的孔壁上或孔口,也會引起本底升高或假陽性。
如果血液未開始凝固或凝固不*時就強行離心分離血清,此時的血清中仍留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結果。
由于ELISA試劑盒試驗在一定溫度下的反應時間并不是反應的終點,溫育時間過短、溫度過低,易致顯色不全;溫育時間過長、溫度過高,易致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*,產(chǎn)生陰性高值或假陽性反應。因此,要嚴格按規(guī)定的溫度和溫育時間進行。
由于水浴較難將溫度控制在穩(wěn)定的范圍,因此我們每次試驗時應認真觀察水浴箱的溫度,盡量少開啟水浴箱門,嚴格控制水浴的溫度為37±0.5。同時,微孔板不可重疊放置,以保證傳熱均勻,各板的溫度都能迅速達到平衡。
由于ELISA試劑盒進口大鼠通常設定的反應溫度為37度,在這個溫度下溫育一定時間,蒸發(fā)的水分會很多,對于整個反應體系來講,各種反應物的濃度會不斷地增加,這樣必會導致反應zui后的值升高。因此溫育時應貼上封板膠。
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ELISA試劑盒進口大鼠

 

 

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